Главная / Каталог ветеринарных препаратов / Диагностикумы / НАБОР ДЛЯ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ ВЕЗИКУЛЯРНОЙ БОЛЕЗНИ (ВБС) И ВЕЗИКУЛЯРНОЙ ЭКЗАНТЕМЫ СВИНЕЙ (ВЭС)

НАБОР ДЛЯ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ ВЕЗИКУЛЯРНОЙ БОЛЕЗНИ (ВБС) И ВЕЗИКУЛЯРНОЙ ЭКЗАНТЕМЫ СВИНЕЙ (ВЭС)

Внимание! Этот справочник доступен на CD. Подробная информация обо всех препаратах, удобный поиск, автоматическое обновление каталога. Подробнее »»

Алфавитный указатель | Препараты по производителям | Препараты по заболеваниям | Поиск

Состав и форма выпуска

В состав набора входят: антигены вируса ВБС, штамм О-72 — 0,5 мл — 3 ампулы (флакона); Т-75 — 0,5 мл — 3 ампулы; антигены вируса ВЭС, штамм С-72 — 0,5 мл — 3 ампулы; штамм А-48 — 0,5 мл — 3 ампулы; сыворотки гипериммунные к вирусу ВБС, штамм О-72 — 0,5 мл — 2 ампулы (флакона), штамм Т-75 — 0,5 мл — 2 ампулы; сыворотки гипериммунные к вирусу ВЭС С-72 — 0,5 мл — 2 ампулы, А-48 — 0,5 мл — 2 ампулы. Антигены и сыворотки ВЕС и ВЭС представляют собой сухую гомогенную аморфную массу серо-белого или кремового цвета, которая после растворения в физиологическом растворе через 2 — 3 минуты должна принять вид прозрачного или слабо опалесцирующего раствора без примесей. Компоненты, не входящие в состав набора, необходимые для постановки РСК: Гемолизин — сыворотка кроликов, гипериммунизированных эритроцитами барана; Комплемент — сухая нормальная сыворотка морских свинок; Эритроциты барана — 2 % взвесь (из осадка отмытых эритроцитов) на физиологическом растворе; Физиологический раствор (ФР) — 0,85 % раствор химически чистой поваренной соли на дистиллированной воде. Компоненты набора выпускают по 0,5 мл в стерильных флаконах или в стерильных ампулах.

Фармакологические свойства

Гипериммунные сыворотки, входящие в состав набора, используют в РСК для идентификации возбудителей ВВС и ВЭС и дифференциации их от вируса ящура и везикулярного стоматита. Эталонные антигены, входящие в набор, предназначены для контроля в РСК специфичности и активности гипериммунных сывороток.

Показания

Для диагностических исследований в лабораториях, занимающихся выделением и идентификацией возбудителей заболеваний, протекающих с везикулярным синдромом.

Дозы и способ применения

Перед применением сухие компоненты набора растворяют в 0,5 мл физиологического раствора и используют для постановки РСК. Подготовка компонентов. Гемолизин. Для определения титра гемолизина из него готовят серию разведении на ФР и затем испытывают его активность, для чего готовят разведение 1 : 100 (0,2 мл гемолизина разводят в 9,8 мл ФР). Затем в отдельной пробирке готовят следующее разведение гемолизина 1 : 1000, для чего к 1,0 мл его и разведении 1 : 100 добавляют 9,0 мл ФР. Это разведение является основным, из которого готовят все последующие разведения. 1 : 1500, 1 : 2000, 1 : 3000, 1 : 4000 и т. д. Схема титрования гемолизина представлена в таблице:

Компоненты	Разведения гемолизина
Компоненты	1 : 1000	1 : 1500	1 : 2000	1 : 3000	1 : 4000	1 : 5000
Гемолизин, мл	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5
Физиологический раствор, мл	1	1	1	1	1	1
Комплемент в разведении 1 : 20, мл	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5
Эритроциты, 2 % взвесь, мл	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5

После внесения компонентов смесь выдерживают в водяной бане при температуре 37 °С, после чего проводят учет реакции. Титром гемолизина считается наивысшее разведение, дающее полный гемолиз эритроцитов. Рабочим разведением гемолизина считается его четырехкратная концентрация от предельного титра (например, предельный титр 1 : 3000, рабочее разведение будет 1 : 750). Поскольку гемолизин, выпускаемый биофабрикой, консервирован глицерином, для приготовления рабочего разведения, его берут вдвое больше, т. е. 2 : 750 или 0,2 мл гемолизина и 74,8 мл ФР. Титрованный гемолизин в рабочем разведении смешивают с равным количеством 2 % взвеси эритроцитов. Полученная смесь называется гемолитической системой. Примечание: титрование гемолизина проводят один раз для новой партии коммерческого препарата, в дальнейшем в реакции используют препарат с уже установленным титром. Эритроциты. Полученную кровь барана дефибринируют, фильтруют через марлю, центрифугируют 10 минут при 2000 — 3000 об/мин. Надосадок отсасывают, а к осадку приливают 8 -10-кратное количество ФР, все тщательно перемешивают и снова центрифугируют, как указано выше. Эту операцию проводят до тех пор, пока жидкость в надосадке будет бесцветной. По окончании отмывания эритроцитов жидкость над осадком тщательно отсасывают пипеткой, а из осадка эритроцитов готовят 2 % взвесь, для чего к 2,0 мл эритроцитов добавляют 98,0 мл ФР. Комплемент. Титрование комплемента ведут в гемолитической системе и обязательно в день постанови реакции. Вначале делают разведение комплемента 1 : 20, затем из него готовят разведения в следующих дозах: 0,05; 0,1; 0,15; 0,2; 0,25 и т. д. до 0,4 мл и добавляют компоненты реакции по схеме:

%-ное содержание цельного комплемента в дозе	0,5	1	1,5	2	2,5	3	3,5	4
Комплемент 1 : 20, мл	0,05	0,1	0,15	0,2	0,25	0,3	0,35	0,4
ФР, мл	0,45	0,4	0,35	0,3	0,25	0,2	0,15	0,1
Гемолизин в рабочем титре, мл	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5
Эритроциты, 2 % взвесь	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5
ФР (вместо антигена и сыворотки), см3	1	1	1	1	1	1	1	1

После внесения компонентов смесь помещают в водяную баню на 15 минут при 37 °С. Титром комплемента считают его наименьшее количество, дающее полный гемолиз эритроцитов. В дальнейшем для постановки главного опыта комплемент берут с постоянным излишком в 2 условные единицы от титра его в гемолитической системе. Например, если титр комплемента в гемолитической системе 1,5 % (см. схему титрования комплемента), для получения рабочего разведения следует взять 2,5 %, при этом разведение комплемента в главный опыт делают из нативного (цельного) комплемента. Главный опыт. При определении типов ВЭС и ВБС позитивные гипериммунные сыворотки и антигены не титруют, а используют их в удвоенных титрах. Например, если предельный титр сыворотки, указанный на этикетке, 1 : 40, то удвоенным титром ее будет разведение 1 : 20; если предельный титр антигена 1 : 8, то удвоенным его титром будет разведение 1 : 4. В качестве испытуемого антигена используют содержимое и стенки афт, а также культуральные суспензии или ткани органов лабораторных животных. Подготовка афтозного материала. Стенки афт промывают ФР, высушивают фильтровальной бумагой, взвешивают, измельчают в фарфоровой ступке с битым нейтральным стеклом до получения однородной массы. Антигены для РСК готовят в виде 33 % суспензии (1 : 3), добавляя к полученному афтозному материалу двойное количество ФР. Взвесь экстрагируют при комнатной температуре и промораживают при минус 20 °С. После размораживания антиген очищают хлороформом: (10 % по объему) и центрифугируют 10 — 15 минут при 3000 — 5000 об/мин. Затем надосадок сливают и используют в качестве антигена. РСК ставят в объеме 0,5 или 1,0 мл. Схема постановки реакции при типировании штаммов вируса ВВС и ВЭС представлена в таблице:

Компоненты	Сыворотки типов				Без сыворотки
Компоненты	ВВС, О-72	ВЕС, Т-75	ВЭС, С-72	ВЭС, А-48	Без сыворотки
Сыворотка в рабочем титре, мл	0,2	0,2	0,2	0,2	0
Испытуемый антиген
Цельный, мл	0,2	0,2	0,2	0,2	0,2
Разведение 1 : 2	0,2	0,2	0,2	0,2	0,2
Разведение 1 : 4	0,2	0,2	0,2	0,2	0,2
Комплемент, мл	0,2	0,2	0,2	0,2	0,2
ФР, мл	0	0	0	0	0,2
Водяная баня 20 минут при 37 °С
Гем. система, мл	0,4	0,4	0,4	0,4	0,4
Водяная баня 30 минут при 37 °С
Учет результатов	++++	-	-	-	-

Следовательно, данный антиген относится к типу ВБС, штамм О-72. Примечание: ++++ — 100 % задержка гемолиза; ++ — 50 % задержка гемолиза; + — 25 % задержка гемолиза; - — полный гемолиз. Одновременно с постановкой главного опыта по определению типов вируса ставят контроль компонентов, участвующих в реакции. Схема постановки контроля к реакции на примере сыворотки ВБС штамм Т-75 представлена в таблице:

Разведения антигенов	Разведения сывороток в рабочих титрах				Без сыворотки
Разведения антигенов	ВБС, Т-75	ВБС, 0-72	ВЭС, С-72	ВЭС, А-48	Без сыворотки
ВБС, Т-75	++++	-	-	-	-
ВБС, О-72	-	++++	-	-	-
ВЭС, С-72	-	-	++++	-	-
ВЭС, А-48	-	-	-	++++	-
Комплемент, 2 ЕД, мл	0,2	0,2	0,2	0,2	-
Гем. система, мл	0,4	0,4	0,4	0,4	-

Особые указания

Серии препаратов, не прошедшие контроль и с истекшим сроком годности, утилизируют автоклавированием при 1 атмосфере (120 — 130 °С) в течение 30 минут.

Условия хранения

В сухом темном месте при температуре от 2 до 8 °С. Срок годности — 24 месяца.

Производитель

Федеральный центр охраны здоровья животных ФГУ (ВНИИЗЖ ФГУ), Россия

Адрес: 600901, г. Владимир, мкр. Юрьевец.
Тел.: (4922) 26-06-14
Тел./факс: (4922) 26-38-77
E-mail: mail@arriah.ru

Подробнее о производителе

Все препараты производства Федеральный центр охраны здоровья животных ФГУ (ВНИИЗЖ ФГУ), Россия

Продавец

Место Вашей рекламы

По вопросам размещения информации

о ветеринарных препаратах и кормовых добавках

в Электронном справочнике "Ветеринарные препараты в России"

и заключения договоров на публикацию

обращайтесь в ООО "Ветторг" по электронной почте: vettorg@mail.ru